中國倉鼠肺細(xì)胞

這株細(xì)胞源自一只雌性中國倉鼠的肺組織，原名V細(xì)胞株， 1958年Elkind將其改名為V79并用于研究培養(yǎng)中的哺乳動物細(xì)胞的X-放射線誘導(dǎo)的損傷及修復(fù)。 該細(xì)胞**球蛋白產(chǎn)物和EB病毒表達(dá)為陰性。 該細(xì)胞表達(dá)Fas抗原且對TNF和抗-Fas抗體敏感。
培養(yǎng)條件：
 完全培養(yǎng)基：RPMI 1640+10%胎牛血清。
培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法：
 收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消DU后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造
成生長不好。
凍存方法：   凍存液：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
  儲存：液氮儲存
 

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